Cryptocaryon irritans - паразитические инфузории, вызывающие заболевание криптокариоз (криптокарион), известно также как «морской ихтиофтириоз». Инфекция поражает морских рыб при температуре 15-30 °C (Burgess and Matthews 1995; Diggles and Lester 1996a; Colorni and Burgess 1997). Криптокариоз это серьезная и распространенная проблема для аквариумистов и коммерческой марикультуры по всему миру. Криптокариоз поражает многие виды рыб, хотя, вероятно, есть различия в восприимчивости (WilkieandGordin 1969; Colorni 1985; ColorniandBurgess 1997).

Были определены различия между штаммами Cryptocaryon в различных частях земного шара, и хотя многие имеют схожие жизненный цикл и допуски к солёности, некоторые из них выходят за рамки указанного стандартного диапазона (Yambotetal. 2003). Была также предположена возможность существования других видов, но в настоящее время Cryptocaryon считается монофилитичным, включающим вид Cryptocaryon irritans.

Признаки поражения криптокариозом, сложные этапы жизненного цикла, а также взрывоопасность заболевания и вероятность гибели за несколько дней (ColorniБерджесс и 1997), во многом схожи с поражением пресноводным паразитом Ichthyophthiriusmultifiliis (Floyd и Рид 2009). Тем не менее виды лишь отдаленно связаны, основными различиями являются восприимчивость к солености и продолжительность жизненного цикла.

Точная диагностика, быстрое реагирование и лечение уменьшат потери, которые могут быть опустошительными.

Рыбы, инфицированные Cryptocaryon irritans, часто имеют на теле маленькие белые точки, узелки и пятна на плавниках, коже и жабрах. Также можно наблюдать и рваные плавники, мутные глаза, бледные жабры, увеличение продуцирования слизи и похудание (Noga 1996; Colorni и Берджесс 1997). Поскольку характерные белые пятна могут быть не видны на бледной рыбке или даже вовсе присутствовать только на жабрах, отсутствие белых пятен или узелков на теле, плавниках, как и самих паразитов на них, не исключает криптокариона. Для уверенности необходима и диагностика жабр.

При поражении поведение рыбки становится тревожным, она трётся о предметы, держится у поверхности воды или на дне, апатична, дыхание более частое, чем при дисстрессе (Colorni и Берджесс 1997). В популяции смертность может быстро нарастать в течение нескольких дней. Однако степень выраженности патологии будет отличаться в зависимости от штамма паразита, вида рыб, наличия предшествующих контактов с инфузорией и температурой воды.

Тем не менее, выраженность патологических изменений зависит от штамма паразита, вида рыб, наличии ранних контактов с инфузорией и температуры воды.

Умеренный криптокариоз. Обратите внимание на скопления белых точек (белые пятна). E.J. Noga.

Cryptocaryon irritans имеет прямой жизненный цикл (ColorniandBurgess 1997). Это означает, что инфекция может распространяться в группе рыб без необходимости в промежуточном хозяине. Тем не менее, жизненный цикл является сложным и включает в себя этапы, которые проходят вне организма рыбы. Каждый этап будет описан более подробно ниже, после краткого описания всего цикла. Трофонт (Trophont) является этапом питания, в течении которого паразит находится непосредственно на рыбе. После созревания трофонт покидает рыбу и становится протомонтом (protomont) перед инцистированием, и превращается в томонт (tomont), или репродуктивную стадию. Томонт развивается и делится на многочисленныхтомитов (tomites), которые в конечном итоге покидают цисту и становятся свободноплавающими контагиозными теронтами (theronts). Теронты активно ищут рыбу-хозяина.

Жизненный цикл Cryptocaryon irritans. RoyYanong.

Длительность жизненного цикла варьируется в зависимости от ряда факторов, в том числе от штамма криптокариоза, температуры, солёности и вида рыб (Colorni 1985; DigglesandLester 1996a, b, c; ColorniandBurgess 1997; Yambotetal. 2003). Даже для конкретного штамма и вида рыбы жизненный цикл может варьироваться от нескольких недель до месяцев (ColorniandBurgess 1997). Средний срок цикла, вероятно, займёт 1-2 недели, однако может длиться от 6 дней до 11 недель, в первую очередь из-за непредсказуемости развития томонта (ColorniandBurgess 1997; Dickerson 2006; Yambot 2003).

Кроме того, некоторые характиристики различных стадий жизненного цикла (например, размер и время, необходимое для развития) варьируют в зависимости от штамма Cryptocaryon irritans, солёности и температуры воды, а также видов инфицированных рыб (DigglesandLester 1996 a, b, c).

Температура для оптимального развития большинства штаммов криптокариоза составляет около 23-30°C (Dickerson 2006; Yoshinaga 2001), хотя активное инфицирование зарегистрировано и при 15°C (DigglesandLester 1996). В экспериментальных условиях с низким содержанием кислорода (24%) наблюдалось выживание в течении 2-4 недель, инфузория покидала хозяина и инцистировалась. Высвобождение свободноплавающих теронов из цисты занимало 10-11 дней.

Более позднее исследование показало, что два различных этапа жизни одного штамма криптокариоза (стадия трофонтов, то есть стадия питания, при которой паразит может быть найден на теле рыбы, и томонты, цисты) сохранялись в течение 4-5 месяцев при температуре 12°C, и после повышения температуры до 27°C развивались и инфицировали рыб (Danetal. 2009).

Наиболее часто можно наблюдать стадию питающегося трофонта. Трофонт находится на рыбе, как правило, под внешним слоем кожи. Сферические, или грушевидные, трофонты с ресничками медленно вращаются и перемещаются под эпителием (внешний слой кожи или жабр). Поскольку трофонт внедряется под кожу, он относительно защищён от любых возможных методов лечения. На данном этапе развития цитоплазма организма непрозрачна, что означает, что дольчатый макронуклеус (и несколько более мелких микронуклеусов) трудно увидеть у живых экземпляров. Трофонты могут варьироваться в размерах от 48 х 27 мкм (~ 1/20 х 1/40 мм) до 452 х 360 мкм (~ 1/2 х 1/3 мм) (1 мкм = 1 мкм, 1000 мкм = 1 миллиметру). Трофонты питаются межклеточной жидкостью и клетками около 3-7 дней до схода с рыбы. Трофонты активно покидают погибших рыб, но становятся заразными не сразу. Им необходимо дополнительное время для перехода от протомонтов к томонтам, также, как если бы они покидали живого хозяина.

Биопсия плавников, срез нефиксированной ткани.

Обратите внимание на различный размер трофонтов (стадия питания). EJ Noga.

Биопсия соскоба кожи, срез нефиксированной ткани. Трофонт (стадия питания).

Georgia Aquarium, Veterinary Services Department. 

Биопсия соскоба кожи, срез нефиксированной ткани.

Трофонт (стадия питания). New England Aquarium.

Биопсия жабр, срез нефиксированной ткани.

Трофонт (стадия питания). Georgia Aquarium, VeterinaryServices Department. 

После того, как трофонт покидает рыбу, он становится протомонтом. Во время этой фазы, в течение 2-18 часов он теряет свои реснички, поверхность становится ровной, и опускается на субстрат. После этой стадии организм неподвижен, прикреплён к субстрату, образована циста, в следствие чего он становится томонтом. Циста твердеет примерно 8-12 часов (Colorni 1985). До образования цисты, протомонты могут быть подвержены некоторой обработке в течении короткого времени. Однако, как только циста томонта сформирована и затвердела, он становится защищен от распространённых методов лечения. 

Томонты варьируются в размерах от 94,5 х 170 мкм (~ 1/10 мм х 1/6 мм) до 252 х 441 мкм (~ 1/4 х 1/2 мм). Томонт одного штамма криптокариоза достигал размера 210 х 763 мкм (~ 1/5 х 3/4 мм). Инцистированный томонт претерпевает многократное деление, образуя многочисленные дочерние томиты (приблизительно от 100 до 1000, в зависимости от штамма и температуры [Colorniand Burgess 1997]). Эти томиты выходят в качестве теронтов, свободноплавающей инфекционной стадии. 

Время, необходимое для развития теронта, варьируется. В одном из проведённых исследований (Colorniand Burgess 1997), теронты образовывались из группы томонтов где-то между 3 и 72 днями, при этом большинство сформировалось от 4 до 8 дня после образования томонта. В другом исследовании (Digglesand Lester 1996c ) развитие томита и выход теронта в среднем происходили от 5 до 12,1 дней после формирования томонта, в зависимости от штамма и температуры. Не было никакой корреляции между размером томона и высвобождением теронтов. Yoshinagaand Dickerson (1994) отмечали в лабораторных исследованиях, что теронты покидали цисту только между 2:00 и 9:00 часами утра, даже в полной темноте; существует предположение, что подобная стратегия теронтов повышает вероятность найти хозяина, так как рыба находится в состоянии покоя и ближе к субстрату. 

Овальные или грушевидные теронты подвижны и активно ищут рыбу. Стадия теронта наиболее уязвимая, незащищенная, и, следовательно, наиболее логична быть мишенью для лечения. Как только теронт находит хозяина, он внедряется под кожу в течение 5 минут (Dickerson 2006). В случае внедрения в жабры паразит заключается в тонкий слой клеток в течении 20-30 минут (Dickerson 2006). Теронты достигают 20-30 х 50-70 мкм (Colorni 1985), но размер будет варьироваться в зависимости от штамма, вида хозяина и температуры. Инфекционная стадия теронта активнее в начале своего существования. По истечении 6-8 часов после выхода из цисты, активность значительно снижается (Burgess 1992; Yoshinagaand Dickerson 1994; Colorniand Burgess 1997; Danetal. 2009), хотя теронт в состоянии двигаться до 48 часов. 

Как и при других заболеваниях, общее состояние здоровья рыб и экологических факторов, включая качество воды, влияют на состояние иммунной системы рыб и возможно усугубление последствий инфекции. Если иммунный статус рыбы находится под угрозой или если экологические факторы не являются оптимальными, криптокариоз будет иметь более взрывной и губительный характер. 

У перенёсших криптокариоз рыб развивается иммунитет, который может предотвратить значительное поражение инфекцией сроком до полугода (Burgess 1992; Burgessand Matthews 1995). Однако выжившие рыбы могут служить в качестве носителей криптокариоза и вызывать в аквариуме вспышки будущих инфекции (Colorniand Burgess 1997). 

На протяжении ряда лет ведётся работа по изготовлению вакцины для защиты от криптокариоза (Yambotand Song 2006; Hatanaka 2007; Luoetal. 2007; Baietal. 2008), и предварительные результаты обнадёживают. Тем не менее, разработка вакцины является длительным процессом, и в настоящее время её нет для коммерческой продажи. 

Криптокариоз может быть трудно диагностировать. Хотя белые пятна, узелки, точки могут быть хорошо видны на рыбе, другие заболевания могут вызывать подобные симптомы. Кроме того, из-за окраса рыбы или локализации инфекции только на жабрах, криптокариоз не виден на рыбе. Для уточнения диагноза необходим микроскопический анализ образцов с кожи, плавников, жабр и идентификация трофонтов, их сферических или грушевидных реснитчатых клеток, вращающихся в тканях. 

Менее опытные рыбоводы могут спутать криптокариоз с другими инфузориями, в том числе с Uronema или даже с Brooklynella. Чтобы получить правильный диагноз и правильное лечение необходимо обратиться к специалисту. 

Понимание жизненного цикла криптокариоза представляет собой научную основу для профилактики заболевания и контроля. Конечной целью мероприятий по предупреждению или контролю заболевания являются прерывание жизненного цикла паразита и предотвращение будущих инфекций. 

Продолжительность каждой стадии жизненного цикла паразита зависит от вида поражённых рыб, их иммунного статуса, штамма криптокариоза и факторов окружающей среды, включая температуру и солёность. Тем не менее, их широкая изменчивость и протяжённость жизненного цикла, и в частности, время необходимое для развития томитов и высвобождения теронтов, наличие защищенных, внедрённых и инцистированных этапов, требуют длительного карантина и периода лечения. Срок минимального карантина 3-6 недель при температуре 24-27°C, могут потребоваться и большие сроки (к примеру, 7-11 недель). 

Вода в уязвимой системе должна подвергаться обработке, чтобы уничтожить свободноплавающих теронтов. Кроме того, субстрат (включая, возможно, часть рыб) может содержать инцистированных томонтов, и сама ёмкость и погружённые предметы выступают в качестве инкубатора паразита, необходимо очистить или заменить их для предотвращения повторной раскрутки инфекции. 

Ознакомьтесь с местными, государственными и федеральными правилами, чтобы убедиться в правовом использовании, прежде чем применять любые лекарства или химию, действуйте, консультируясь со специалистами. Узнайте правильную дозировку, потенциальную токсичность для рыб или беспозвоночных, и о рациональном использовании. 

Предположение о использовании ультрафиолетового стерилизатора (УФ) было сделано на основе исследований Ichthyophthirius multifiliis (пресноводный ихтиофтириоз). Рекомендуемая доза УФ для теронтов Ichthyophthirius составляет 100000 μWsec/см 2 (Hoffman, 1974). Однако, УФ-дозы необходимые для уничтожения теронтов криптокариоза варьируются от 280,000 µWsec/cm2 до 800,000 µWsec/cm2 (Colorniand Burgess 1997). 

Теронты должны пройти через УФ стерилизатор, чтобы подвергнуться воздействию, поэтому теронты не подвергнутые воздействию УФ останутся невредимыми. Аналогично, и инцистированные томонты внутри резервуара не будут затронуты. 

Озонирование - высокоэффективный метод обеззараживания воды, но является более сложным и может повлиять на качество воды, особенно, вступая в реакцию с растворёнными солями. Существует ограниченная информация о дозах, необходимых для уничтожения теронтов или других стадий жизни инфузории (ColorniandBurgess 1997). Уточняйте рекомендации производителей для вашей системы. 

Простейшим, но неподходящим для больших популяций рыб, способом прерывания цикла криптокариоза является пересадка рыб в новый стерильный голый аквариум каждые три дня (Colorni 1987). Заражённый аквариум чистят, дезинфицируют (см. Дезинфекция ниже) и сушат после использования. Такой подход снижает и предотвращает развитие томонтов на субстрате и последующее повторное заражение. В зависимости от температуры, потребуется 3-5 пересадок. 

Несколько вариантов медикаментозного лечения используются наиболее часто и эффективно в морских аквариумах. Большинство нацелено на борьбу с свободноплавающими теронтами. Стандартная ванна с препаратами на основе меди, по мнению многих, является наиболее эффективной; снижение концентрации солей и хлорохин. Формалин, хотя и реже описан в литературе для лечения криптокариоза, также был использован с переменным успехом. 

Медь, в виде пентагидрата сульфата меди (CuSO4 • 5H20, "синяя" медь), является, пожалуй, наиболее часто используемым средством от протозойных паразитов морских рыб. При использовании в морских системах считают пригодным 25,5% пентагидрат сульфата меди (то есть 25,5% активного вещества, "свободная медь" (Cu2+ )). 

Рекомендуемая доза составляет 0,15-0,20 мг/л свободной меди (Cu2+ ) (Noga 1996); однако нужную концентрацию необходимо поднимать постепенно, предпочтительно за 2-3 дня, также необходима высокая точность дозирования. Этот период позволит рыбе адаптироваться и снизить токсическое действие меди (deBoecketal. 2003). Необходимо измерять тестами уровень меди во время лечения, так как он может колебаться. Проводить тесты придётся, как минимум дважды в день, чтобы гарантировать, что показатели в пределах желаемого диапазона. 

Из-за длительного жизненного цикла криптокариоза, лечение проводится 3-6 недель. Как описано выше, по некоторым данным теронты могут высвобождаться спустя 72 дня после образования томонта, так что некоторые ситуации могут потребовать более длительных периодов обработки. 

Также используются хелатные комплексы меди (соединения меди с цитратом или ЭДТА для повышения стабильности в воде), но безопасность и эффективность более непредсказуемы в сравнении с пентагидратом сульфата меди. Если вы используете коммерческий продукт, то обратитесь к инструкциям производителя. 

Снижение концентрации соли в воде заключается в помещении рыбы в солевой раствор, концентрация которого ниже, чем та, в которой она живёт (типичный для тропической морской системы диапазон 30-35 г/л ). Многие виды морских рыб, требующие стабильный уровень солёности (стеногалинные), плохо переносят эту процедуру. Таким образом, для многих видов, чем ниже соленость, тем короче период, который рыбы могут переносить. Пресные или низкой солёности ванны (длительность в минутах), либо более продолжительные ванны (длительностью в несколько часов или дней) для выносливых рыб, используются для уничтожения или уменьшения числа внешних паразитов. 

Тем не менее, криптокариоз оказался достаточно стойким к изменению солености. Трофонты и томонызащищены, потребуется больше ванн, чем для многих других паразитов. Воздействия на срок до 18 часов не влияют на трофонтовкриптокариоза на рыбах (Colorni 1985). Длительное нахождение в воде с солёностью 15-16 г/л или менее (Cheungetal. 1979; Colorni 1985) пагубно влияют на некоторых этапах жизни криптокариоза. Томонты одного из штаммов погибли через 48 часов (Colorni 1985). Температура также оказывает влияние, температура за пределами оптимального диапазона (23-30°C) вызывает большее повреждение томонтов (Cheungetal. 1979). 

Исследования показали различные допуски солёности среди штаммов. Yambot (2003) описал тайваньский штамм вспыхивающий на Sparussarba при солёности 5 г/л, а другой штамм на Latescalcarifer - при солёности 10 г/л. Эти два штамма успешно размножают в лаборатории при солёности 7 и 10 мг/л, соответственно, значения предпочтительной солёности существенно ниже описанных ранее. 

Был предложен протокол, который может иметь некоторую эффективность, в зависимости от температуры, солёности и толерантности штамма, - поддержание пониженной солёности, 15 г/л в течение 21-30 дней (Noga 1996; Kinsler, pers. comm.). Солёность следует снижать постепенно от 5 до 10 г/л в сутки, пока не будет достигнута концентрация 15 г/л. 

Хлорохин, производный хинина, и другие родственные соединения рекомендованы для использования против криптокариоза и других паразитических простейших, включая Amyloodinium (Dickerson 2006; Stoskopf 1993; Noga 1996; Robertsetal. 2009; I Berzins, pers. comm.; T.Clauss, pers. comm.). Одна из рекомендуемых схем лечения - длительная ванна сроком от 2-3 недель и более с 10 мг/л дифосфатахлорохина. Хлорохин достаточно стабилен. При необходимости смены части воды, повторяют дозу пропорционально смененному количеству воды. 

С переменным успехом и различными режимами дозировок был использован формалин (Hoff 1996; Colorniand Burgess 1997; R.Francis-Floydand D. Pettypers. comm. 2009).Один из способов предполагал одновременное снижение солёности (16-18 г/л) и 25 мг/л формалина через день, в течение 4 недель (R.Francis-Floydand D. Pettypers. comm.). 

Существует ряд методов для дезинфекции томонтов и теронтов криптокариоза (Hirazawaetal. 2003). Рассмотрим следующие эффективные схемы: 1 час экспозиции при температуре 40°C или 100 мг/л хлорида бензалкония; 24 часа экспозиции при 60 мг/л хлора или сушка. Свободноплавающие теронты легко погибают после одной из этих процедур: 1 час воздействия 2,4 мг/л хлора; 1 час при 100 мг/л хлорид бензалкония, или при температуре 40°C. 

Хорошая программа профилактики, разработанная со специалистами, будет включать карантин новых рыб (Yanong 2009). Карантин водных растений, беспозвоночных (в том числе креветки, моллюски, кораллы, живые камни), субстратов и других материалов, которые могли иметь контакт с больной рыбой и/или могут содержать томонты (репродуктивную, инцистированную стадию) до введения их в систему. Любое используемое оборудование или емкости должны быть надлежащим образом продезинфицированы перед повторным использованием. Аэролизациятеронтов или других этапов жизни из одной емкости в другую, вероятно, возможно, особенно если емкости сильно аэрируются и движение потока воздуха способствует. Аэролизация как способ распространения паразитов была продемонстрирована на примере Ichthyophthirius (Woosteretal. 2001). 

В идеале, вы должны протестировать кожу, плавники и жабры рыбы на наличие криптокариоза до, вовремя и после карантина (и принять меры по лечению, если криптокариоз присутствует). Использование пониженной солёности, лекарств или химических веществ во время карантина также послужат снижению шансов на дальнейшее распространение инфекции. Трофонты на рыбе и инцистированные стадии (томонты) хорошо защищены от многих распространённых методов лечения. Свободноплавающиетеронты наиболее восприимчивы к препаратам, и являются мишенью процедур. 

Однако, имейте в виду, что носители уже могут присутствовать в вашей системе и тем самым заразить новую добавленную рыбу, даже если до этого рыба прошла карантин. 

Криптокариоз, возбудитель болезни "белых точек", является опасным заболеванием рыб морской и солоноватой воды. Общие признаки болезни включают белые точки или пятна, увеличение продуцирования слизи, затруднённое дыхание, или респираторныйдистресс, однако могут быть другие причины, рыбы должны быть проверены специалистом на наличие паразитов при помощи микроскопа. 

Многие факторы определяют насколько тяжёлым окажется заболевание и какая будет смертность, какая длительность жизненного цикла паразита. Эти факторы включают штаммы, температуру, солёность воды, вид и возраст рыб и их общий иммунный статус, предшествующее воздействие криптокариоза, количество присутствующих паразитов, концентрацию кислорода в воде. Жизненный цикл может длиться от 6 дней до 11 недель, но в среднем цикл жизни паразита занимает 1-2 недели. Тем не менее, рекомендуется длительное лечение (3-6 недель). Может потребоваться и более продолжительное время. 

Лечение, рекомендуемое в данной публикации, при любой вспышке должно обеспечить смягчение последствий заболевания. Пентагидрат сульфата меди представляется наиболее эффективным методом лечения на сегодняшний день. Хлорохин и изменения солёности, а также формалин, тоже имеют некоторую эффективность. Если штамм криптокариоза толерантен к сниженной солёности, то метод снижения солёности не будет эффективным. 

Карантирование любой новой рыбы в течение 30-90 дней до посадки в общий аквариум даст время для наблюдения, лечения и препятствия распространению криптокариоза. Кроме того, любое оборудование и прочие предметы также надо дезинфицировать перед повторным применением в других системах. Клинически здоровые рыбы, перенёсшие криптокариоз, могут выступать в качестве носителей. 

Таблица 1. Химическая обработка против криптокариоза. 

Метод/вещество	Концентрация	Продолжительность обработки	Стадия криптокариоза
Бензалконий хлорида	100 мг/л	1 час	Томонт, теронт
Хлор	2,4 мг/л	1 час	Теронт Теронт
Хлор	60 мг/л	24 часа	Томонт, теронт
Высушивание		24 часа	Томонт, теронт
Нагрев	40°C	1 час	Томонт, теронт